在液相色譜（LC）的日常使用中，“堵” 和 “漏” 是最常見(jiàn)的兩大 “病癥”—— 它們不僅會(huì)導(dǎo)致儀器壓力異常、基線波動(dòng)、保留時(shí)間漂移，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)損壞核心部件（如泵、色譜柱），影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。要解決這兩個(gè)問(wèn)題，需先明確 “堵” 和 “漏” 的常見(jiàn)位置、成因，再針對(duì)性排查處理。
一、“堵”：流路不暢的核心問(wèn)題
“堵” 本質(zhì)是液相色譜流路中（如管道、色譜柱、閥門等）出現(xiàn)固體雜質(zhì)或析出物，導(dǎo)致流動(dòng)相無(wú)法順暢通過(guò)，表現(xiàn)為系統(tǒng)壓力異常升高（如突然超過(guò)正常壓力上限）、流量不穩(wěn)定，甚至完全斷流。
1. 常見(jiàn) “堵點(diǎn)” 及成因
液相色譜的流路從 “流動(dòng)相瓶” 到 “檢測(cè)器出口” 是連貫的，“堵點(diǎn)” 多集中在易截留雜質(zhì)或易析出物質(zhì)的部位：
溶劑過(guò)濾器（吸濾頭）：直接接觸流動(dòng)相，若流動(dòng)相未過(guò)濾、瓶中有沉淀（如緩沖鹽結(jié)晶），或長(zhǎng)期使用后吸附了微生物 / 顆粒物，會(huì)堵塞濾頭孔隙。
單向閥：控制流動(dòng)相單向流動(dòng)的核心部件，內(nèi)部有寶石球和閥座。若流動(dòng)相中含微小顆粒，會(huì)卡住寶石球；若緩沖鹽在閥內(nèi)析出，會(huì)導(dǎo)致密封不嚴(yán)，間接引發(fā) “假性堵塞”（壓力波動(dòng)）。
進(jìn)樣閥：進(jìn)樣時(shí)樣品直接通過(guò)，若樣品未過(guò)濾（含顆粒物）、進(jìn)樣量過(guò)大導(dǎo)致過(guò)載，或樣品中的高濃度鹽 / 有機(jī)物在閥內(nèi)殘留析出，會(huì)堵塞定量環(huán)或轉(zhuǎn)子密封槽。
色譜柱：最核心的分離部件，固定相（如 C18 硅膠）的孔徑僅幾微米到幾十納米。若樣品含顆粒物、未去除蛋白 / 油脂等大分子，或流動(dòng)相中的鹽在柱內(nèi)析出，會(huì)堵塞固定相孔隙，甚至導(dǎo)致柱頭塌陷。
檢測(cè)器流通池：孔徑極?。ㄍǔ?< 1mm），若前序流路的雜質(zhì)未被截留（如色譜柱柱頭塌陷后漏出的填料），會(huì)直接堵塞流通池，導(dǎo)致壓力驟升。
2. “堵” 的解決與排查步驟
解決 “堵” 的核心是 “定位堵點(diǎn)→清除堵塞物→預(yù)防再次堵塞”，可按以下步驟排查：
第一步：定位堵點(diǎn)
通過(guò)分段測(cè)試壓力判斷：關(guān)閉泵，斷開(kāi)某部件（如先斷開(kāi)色譜柱，僅測(cè)試 “泵→進(jìn)樣閥→檢測(cè)器” 的壓力；再斷開(kāi)檢測(cè)器，測(cè)試 “泵→進(jìn)樣閥” 的壓力），對(duì)比各段壓力是否正常（正常壓力范圍需結(jié)合儀器型號(hào)，如常規(guī)分析柱系統(tǒng)正常壓力多在 5-20 MPa）。
若斷開(kāi)色譜柱后壓力恢復(fù)正常：堵點(diǎn)在色譜柱或其后的流路（如檢測(cè)器）。
若斷開(kāi)進(jìn)樣閥后壓力恢復(fù)正常：堵點(diǎn)在進(jìn)樣閥或之前的流路（如單向閥、溶劑過(guò)濾器）。
第二步：針對(duì)性處理 “堵點(diǎn)”
溶劑過(guò)濾器堵塞：取下濾頭，用 30% 硝酸浸泡 1 小時(shí)（去除金屬雜質(zhì)）或甲醇超聲 15 分鐘（去除有機(jī)物），蒸餾水沖洗后晾干；若堵塞嚴(yán)重（如濾頭變色、孔隙完全堵死），直接更換新濾頭。
單向閥堵塞：拆開(kāi)單向閥（需按儀器說(shuō)明書(shū)操作），用甲醇或異丙醇超聲清洗寶石球和閥座（去除顆粒物）；若有鹽析出，可用熱水超聲（溶解鹽類）；若寶石球或閥座磨損（如卡頓無(wú)法復(fù)位），需更換單向閥。
進(jìn)樣閥堵塞：用 “洗針液”（如甲醇 - 水）反復(fù)沖洗定量環(huán)，或手動(dòng)進(jìn)樣 “強(qiáng)溶劑”（如純甲醇）沖洗；若轉(zhuǎn)子密封槽堵塞，可在儀器上執(zhí)行 “閥清洗程序”（大流量沖洗密封面）；若堵塞物為鹽，可用熱水沖洗。
色譜柱堵塞：先嘗試 “反沖”（將色譜柱反向連接，用低流速純?nèi)軇_洗柱頭，如 C18 柱用純甲醇），去除柱頭殘留的顆粒物；若反沖無(wú)效，可挖去柱頭最上層 1-2mm 的污染填料（需專業(yè)操作，避免破壞柱床）；若柱效已嚴(yán)重下降（如理論塔板數(shù)驟降），需更換新柱。
檢測(cè)器流通池堵塞：斷開(kāi)流通池，用注射器注入甲醇或熱水（針對(duì)鹽堵）緩慢沖洗；若堵塞嚴(yán)重，需聯(lián)系廠家更換流通池。
3. “堵” 的預(yù)防：比處理更重要
“堵” 的核心是 “雜質(zhì)進(jìn)入流路”，預(yù)防需從源頭控制：
流動(dòng)相預(yù)處理：所有流動(dòng)相（包括水、有機(jī)溶劑、緩沖鹽）必須經(jīng) 0.45μm 濾膜過(guò)濾（水相 / 緩沖鹽用水系濾膜，有機(jī)相用有機(jī)系濾膜）；緩沖鹽溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免長(zhǎng)期放置析出結(jié)晶；含易滋生微生物的流動(dòng)相（如純水相）需添加防腐劑（如 0.01% 疊氮化鈉）。
樣品預(yù)處理：樣品需經(jīng)離心（12000rpm，10 分鐘）或 0.22μm 濾膜過(guò)濾（去除顆粒物）；含蛋白、油脂等大分子的樣品，需先經(jīng)固相萃?。⊿PE）或蛋白沉淀處理，避免污染色譜柱。
日常維護(hù)：
每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用純?nèi)軇ㄈ缂状迹_洗系統(tǒng) 30 分鐘以上（尤其用了緩沖鹽后，需徹底沖洗殘留鹽，避免析出）；
長(zhǎng)期不用儀器時(shí)，溶劑過(guò)濾器需浸泡在甲醇中（避免微生物滋生）；
定期（如每月）檢查單向閥、溶劑過(guò)濾器狀態(tài)，及時(shí)清洗或更換。
二、“漏”：密封失效的典型表現(xiàn)
“漏” 是流動(dòng)相從流路的密封部位（如接頭、密封圈）滲出，表現(xiàn)為儀器表面有液滴、系統(tǒng)壓力異常降低（如壓力驟降且流量不足）、基線噪音增大（漏液進(jìn)入檢測(cè)器光路），嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相浪費(fèi)、實(shí)驗(yàn)環(huán)境污染，甚至損壞電路部件。
1. 常見(jiàn) “漏點(diǎn)” 及成因
“漏” 的核心是密封部件失效，常見(jiàn)漏點(diǎn)集中在 “需要拆卸連接” 或 “長(zhǎng)期摩擦 / 受壓” 的部位：
管路接頭：最常見(jiàn)漏點(diǎn)。若接頭未擰緊（力度不足）、過(guò)度擰緊（導(dǎo)致螺紋滑絲），或接頭 / 管路內(nèi)壁有劃痕（如多次拆卸磨損），會(huì)導(dǎo)致密封不嚴(yán)。
泵密封圈（柱塞桿密封）：泵的柱塞桿反復(fù)運(yùn)動(dòng)，密封圈長(zhǎng)期摩擦?xí)匣?、磨損；若流動(dòng)相含顆粒物，會(huì)加速密封圈劃傷，導(dǎo)致流動(dòng)相從柱塞桿與密封圈的縫隙漏出。
進(jìn)樣閥密封圈（轉(zhuǎn)子密封）：進(jìn)樣閥的轉(zhuǎn)子與定子長(zhǎng)期旋轉(zhuǎn)摩擦，或樣品中的強(qiáng)腐蝕性物質(zhì)（如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿）侵蝕密封圈，會(huì)導(dǎo)致密封失效，漏液從進(jìn)樣口或廢液口滲出。
色譜柱接口：色譜柱兩端的接頭若未與儀器管路對(duì)齊（如角度偏差）、接口磨損，或柱端篩板松動(dòng)（如反沖時(shí)壓力過(guò)大），會(huì)導(dǎo)致漏液。
檢測(cè)器出口：若檢測(cè)器流通池出口管路堵塞（如之前的 “堵” 未解決），壓力過(guò)高會(huì)頂開(kāi)出口接頭，導(dǎo)致漏液。
2. “漏” 的解決與排查步驟
解決 “漏” 需先找到漏點(diǎn)（肉眼觀察或用濾紙排查），再根據(jù)漏點(diǎn)類型處理：
第一步：定位漏點(diǎn)
開(kāi)機(jī)后觀察儀器表面，重點(diǎn)檢查：接頭連接處（用濾紙擦拭，若濾紙變濕則為漏點(diǎn)）、泵的柱塞桿附近（是否有液滴）、進(jìn)樣閥廢液管（是否漏液）、色譜柱兩端接口（是否有結(jié)晶或液痕）。
第二步：針對(duì)性處理 “漏點(diǎn)”
管路接頭漏液：先關(guān)閉泵，松開(kāi)接頭后重新對(duì)齊（確保管路與接頭同軸），再用手輕輕擰緊（液相接頭多為 “手緊 + 半圈”，避免用工具過(guò)度擰緊）；若接頭磨損（如螺紋滑絲），直接更換新接頭。
泵密封圈漏液：若漏液輕微，可先檢查流動(dòng)相是否潔凈（避免顆粒物磨損）；若漏液嚴(yán)重（如柱塞桿有明顯液痕），需按說(shuō)明書(shū)更換密封圈（注意型號(hào)匹配，如 PEEK 材質(zhì)耐有機(jī)溶劑，PTFE 材質(zhì)耐酸堿）。
進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子漏液：執(zhí)行 “閥清洗” 程序，去除殘留污染物；若漏液持續(xù)，說(shuō)明密封圈老化，需更換轉(zhuǎn)子密封組件（更換時(shí)注意清潔，避免雜質(zhì)進(jìn)入）。
色譜柱接口漏液：重新對(duì)齊色譜柱與管路接口，輕輕擰緊；若柱端篩板松動(dòng)，需聯(lián)系廠家維修（不可自行拆卸）；若接口磨損，更換色譜柱接頭。
檢測(cè)器出口漏液：先排查是否因流通池堵塞導(dǎo)致壓力過(guò)高（參考 “堵” 的處理），疏通后再重新擰緊出口接頭。
3. “漏” 的預(yù)防：減少密封部件損耗
規(guī)范操作連接部件：安裝接頭時(shí)確保 “對(duì)齊同軸”（避免角度偏差導(dǎo)致磨損），擰緊力度以 “不漏液” 為原則（無(wú)需過(guò)度用力）；拆卸時(shí)用專用工具（如扳手），避免徒手硬擰。
避免腐蝕性物質(zhì)損傷：若樣品 / 流動(dòng)相含強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或強(qiáng)有機(jī)溶劑（如二氯甲烷），需選擇耐腐蝕性密封圈（如 PEEK 材質(zhì)），并縮短實(shí)驗(yàn)后沖洗時(shí)間（及時(shí)用中性溶劑沖洗）。
定期更換易損件：密封圈、轉(zhuǎn)子密封等屬于消耗品，需根據(jù)使用頻率定期更換（如常規(guī)實(shí)驗(yàn)每 3-6 個(gè)月檢查一次，高頻使用每月檢查）。
總結(jié)：“堵” 和 “漏” 的核心應(yīng)對(duì)邏輯
堵：防大于治—— 通過(guò) “過(guò)濾（流動(dòng)相、樣品）、清洗（實(shí)驗(yàn)后及時(shí)沖系統(tǒng)）、避免鹽析出（不用時(shí)用純?nèi)軇┍４妫?減少雜質(zhì)進(jìn)入流路，從源頭降低堵塞風(fēng)險(xiǎn)。
漏：規(guī)范 + 維護(hù)—— 通過(guò) “正確連接、避免過(guò)度用力、定期更換易損件” 保護(hù)密封部件，發(fā)現(xiàn)漏液及時(shí)處理（避免壓力異常加劇磨損）。
掌握這兩大 “病癥” 的排查邏輯后，日常使用中可通過(guò) “壓力監(jiān)測(cè)（堵）” 和 “目視檢查（漏）” 提前預(yù)警，將故障解決在萌芽階段，既能延長(zhǎng)儀器壽命，也能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的
